簡要描述:
總巰基測試盒主要包括巰基和蛋白質巰基。前者不僅能夠修復氧化損傷的蛋白質,而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質構象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質巰基含量。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:764
商品詳情:
總巰基測試盒測定意義:
生物體內巰基主要包括胱甘肽巰基和蛋白質巰基。前者不僅能夠修復氧化損傷的蛋白質,而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質構象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質巰基含量。
測定原理:
巰基基團與5,5’-二硫代-雙-甲酸(DTNB)反應,生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。
自備實驗用品:
天平、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。
標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。
商品屬性:
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3562 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3562-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測定操作:
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到570 nm,蒸餾水調零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。
3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。
4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。
注意:空白管和標準管只需要測定一次。
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